手性分析是用什么方法進(jìn)行分離測(cè)定?手性藥物是指藥物分子結(jié)構(gòu)中引入手性中心后,得到的一對(duì)互為實(shí)物與鏡像的對(duì)映異構(gòu)體。液相色譜法成為目前手性藥物分離測(cè)定的首選方法,根據(jù)實(shí)際工作中需要的手性分離問(wèn)題。
手性分析很關(guān)鍵的一項(xiàng)是流動(dòng)相的選擇,手性分析一般都采用正相,使用最多的流動(dòng)相是正己烷、正庚烷、乙醇和異丙醇這四種,其中起洗脫作用的流動(dòng)相是乙醇和異丙醇,正己烷和正庚烷用來(lái)調(diào)節(jié)流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度。
正己烷和正庚烷對(duì)于樣品分離沒(méi)有什么太大的影響,不會(huì)改變選擇性和分離度,通常都可以混用,不過(guò)正庚烷比正己烷對(duì)人體的傷害要小很多,但價(jià)格是后者的一倍,所以歐美的很多大制藥公司多使用正庚烷,而國(guó)內(nèi)多使用正己烷。
乙醇和異丙醇對(duì)樣品的分離起關(guān)鍵的作用,不同的醇有不同的選擇性,改變醇的種類(lèi)可以改變選擇性,常用的醇類(lèi)是乙醇和異丙醇,甲醇不能使用是因?yàn)樗驼和椤⒄椴换ト?,叔丁醇粘度太大,一般作為添加劑配合乙醇或者異丙醇少量使用,提供特殊的選擇性,通常能起到意想不到的效果。
一般情況下分析手性樣品,很多人推薦首選異丙醇,但是我喜歡首選乙醇,因?yàn)橐掖細(xì)馕侗犬惐己靡稽c(diǎn),且乙醇做流動(dòng)相壓力要低一些,實(shí)際上二者差別不是太大。
流動(dòng)相里經(jīng)常需要添加酸或者是堿來(lái)調(diào)節(jié)峰形,常用的酸有三氟乙酸、乙酸和甲基磺酸,堿一般是二乙胺和三乙胺,也有用乙醇胺和異丁胺的,流動(dòng)相里添加酸和堿的濃度一般要求控制在0.2%(體積比)以下,我們一般用0.1%,使用的原則一般是酸性樣品加酸,堿性樣品加堿,
但實(shí)際上很多樣品是即含酸性基團(tuán)又含堿性基團(tuán),這就要看哪個(gè)基團(tuán)作用強(qiáng)了,對(duì)于某些含氨基的兩性樣品,例如苯甘氨酸,甲基磺酸是一個(gè)非常好的選擇,磺酸基能夠抑制氨基的堿性,又能提供一個(gè)酸性的流動(dòng)相環(huán)境,使樣品既能得到很好的分離又能獲得對(duì)稱(chēng)的峰形。