在實(shí)驗(yàn)當(dāng)中使用色譜柱時(shí)總是會(huì)遇到色譜峰拖尾的問(wèn)題,那么為什么會(huì)出現(xiàn)色譜峰這種情況呢?下面就跟著研創(chuàng)生物一起來(lái)看看吧!
1、色譜柱物理?yè)p壞
色譜柱有物理?yè)p壞是造成峰形拖尾的根源,解決方法就是更換新柱。
2、色譜柱內(nèi)填料污染
流動(dòng)相和樣品中的雜質(zhì)是色譜柱主要污染源。
3、色譜柱進(jìn)口處有異物
當(dāng)斷定是柱進(jìn)口處有異物時(shí),可將柱頭螺絲卸下,取出濾帽并將其置于20%硝酸溶液中,用超聲波清洗約20分鐘,再置于超純水中,并用超聲波清洗約10分鐘,重新裝入色譜柱內(nèi)即可。
4、緩沖不足或不合適
在緩沖不好或離子強(qiáng)度過(guò)低的分離中,也會(huì)出現(xiàn)保留時(shí)間重現(xiàn)性差和峰形拖尾。增加緩沖濃度(與樣品大小相匹配)能改善此情況。
5、色譜柱內(nèi)金屬污染
柱內(nèi)金屬污染(Fe,Ni等)可引起某引些化合物峰形拖尾。金屬可由填料本身帶進(jìn),也可由腐蝕性流動(dòng)相緩慢溶解柱進(jìn)口的金屬濾片,隨流動(dòng)相沉積到柱填料中。