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色譜柱化學性質和進樣技術的選擇

欄目:行業(yè)資訊 發(fā)布時間:2022-05-17

  色譜柱化學性質。

  硅膠基質:最通用的基質,強度大,化學修飾容易,但使用的pH值范圍有限(一般為2—8,特殊修飾的可以達到1—12)。

  聚合物基質:多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂,化學穩(wěn)定,應用pH范圍寬,具有更強的疏水性,對蛋白質等樣品分離效果較好,但強度較小,有機溶劑可能導致聚合物溶脹而受損,批次重復性較差,商品化色譜柱不多,一般價格較貴。

  載碳量:基質表面色譜柱鍵合相的比例,載碳量高,則保留增加,適合分析非極性化合物。

  鍵合相:鍵合試劑不同,對化合物的選擇性不同,一般長鏈的烷基鍵合相(C18C8)比短鏈的(C4C3)穩(wěn)定,非極性的鍵合相比極性的鍵合相(-NH2)穩(wěn)定。

  封端:用短鏈將裸露的硅羥基鍵合后封閉起來,以減少殘留的硅醇基,減輕待測組分與酸性硅羥基反應而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象,尤其對于極性樣品而言,色譜柱未封端處理的色譜柱分離效果較差。

  在氣相色譜分析中,一般采用注射器或六通閥門進樣,在考慮進樣技術的時候,以注射器進樣為主來研究。

  進樣量:進樣量應控制在瞬間氣化,達到規(guī)定分離要求和線性響應的允許范圍內(nèi),填充柱沖洗法的瞬間進樣量:液體樣品或固體樣品溶液一般為0.01~10μl,氣體樣品一般為0.11~10ml,在定量分析中,應注意進樣量讀數(shù)準確。

  注射器里空氣的排除:用微量注射器抽取液體樣品,色譜柱只要重復地把液體抽入注射器又迅速把其排回樣品瓶,就可以將空氣排除,或著用計劃注射量的約2倍的樣品置換注射器3~5次,每次取到樣品后,垂直拿起注射器,針尖朝上,留在注射器里的空氣都應當跑到針管頂部,推進注射器塞子,空氣就會全部被排掉。

  保證進樣量的準確:用經(jīng)置換過的注射器取約計劃進樣量2倍左右的樣品,垂直拿起注射器,針尖朝上,讓針穿過一層紗布,這樣可用紗布吸收從針尖排出的液體。

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