色譜柱柱效是色譜柱對(duì)色譜中兩種物質(zhì)分離能力的大小,柱效越高,分離效果越好,峰形越好,反之則分離效果差,度峰形差,甚至不能完全分開(kāi)兩個(gè)物質(zhì),色譜柱的柱效和填料,柱問(wèn)長(zhǎng),柱內(nèi)徑均有關(guān)系,一般來(lái)說(shuō),填料越細(xì)密,柱長(zhǎng)徑比越大,柱效越高。
色譜柱的柱效能是評(píng)價(jià)色譜性能的一項(xiàng)重要指標(biāo),混合物能否在色譜柱中得到分離,除取決于選擇合適的固定相外,還與色譜操作條件及色譜柱的裝填狀況等因素有關(guān)。
不過(guò)在HPLC中,色譜柱柱效一般出廠(chǎng)后就基本固答定,隨著使用過(guò)程的損耗而柱效降低,人工填柱的色譜柱,因?yàn)槊看窝b柱時(shí)所用的溶液,填料量都不盡相同,因此柱效也會(huì)有變化,測(cè)柱效主要是看柱是否具有良好的分離效果。
在實(shí)際工作中,我們通過(guò)對(duì)載氣流速,進(jìn)樣技術(shù),氣化室溫度,色譜柱,柱溫,檢測(cè)器溫度這六個(gè)方面的選擇,有效地提高了柱效率,使分析出的色譜峰峰形正常,無(wú)峰形擴(kuò)張,拖尾,峰漏檢等不良現(xiàn)象出現(xiàn),分離度高,從而提高了分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。
色譜柱所謂柱效就是在較短的時(shí)間內(nèi),用較短的柱子達(dá)到滿(mǎn)意的分析結(jié)果,為了提高色譜柱的柱效率,減少色譜峰擴(kuò)張,拖尾及峰漏檢等現(xiàn)象.。
裝填好的色譜柱還需要進(jìn)行老化處理后,才能接至檢測(cè)器使用,老化的目的有兩個(gè):(1)為了徹底除去固定相中殘余溶劑和某些揮發(fā)性雜質(zhì),確保檢測(cè)器不收污染,使之有較低的本底電流。
?。?)進(jìn)一步促使固定液均勻地,牢固地分布在載體表面上,可以提高柱效能,老化的方法是:把色譜柱接入載氣氣路系統(tǒng)(色譜柱為安全起見(jiàn),一般采用氮?dú)庾鬏d氣),色譜柱的一端接在汽化室上,另一端放空(不要接在檢測(cè)器上,防止沾污),用10——20ml/分的載氣流速,略高于操作溫度10°C—20°C(但要低于固定液的最高使用溫度極限)的條件下,通氣4—8h甚至24h,基本老化好后,再接上檢測(cè)器檢查,當(dāng)記錄儀基線(xiàn)平直以后,老化過(guò)程才算結(jié)束,千萬(wàn)注意,上述老化色譜柱的接法,不適用于以氫氣作載氣老化,否則氫氣放空在色譜爐中易發(fā)生爆炸事故。
廣州研創(chuàng)是國(guó)內(nèi)專(zhuān)業(yè)的手性色譜柱,手性色譜填料研發(fā)及生產(chǎn)廠(chǎng)家,是手性分離材料與手性色譜柱領(lǐng)域?qū)I(yè)化運(yùn)營(yíng)的中國(guó)品牌,廣州研創(chuàng)生物可提供手性藥物分離純化及工業(yè)制備的一體化解決方案,包括手性分析方法開(kāi)發(fā)及手性制備分離制備服務(wù)等,http://ysdg.net/。