C18柱因不同鍵合方式、粒徑的不同、不同的長度、內(nèi)徑等因素表現(xiàn)出不同的選擇性。這樣市場上就有數(shù)百種不同選擇特性的C18色譜柱。

對于傳統(tǒng)的C18柱，pH值使用范圍一般為2~7，因為pH值高于8時C18固定相會受到限制。由于殘留硅羥基的存在，容易對堿性化合物造成不可逆的吸附，造成峰尾，影響分離分析。pH如果值太低，鍵合烷基就會脫落，成分的分離也不能滿足要求。

1.酸性條件下C18柱的選擇

為了改善C18柱在低pH值時的穩(wěn)定性，有人提出了空間位阻的方法。

空間位阻作用是指連接大基團，阻礙溶質(zhì)基團攻擊硅醇基，使硅氧烷再生，提高化學鍵固定抗水解能力。

還有人在側(cè)鏈中制備了異丙基或異丁基C18化學鍵合固定相。由于固定相引入了較大的側(cè)鏈基團，三維阻礙了殘留硅醇基和溶質(zhì)之間的相互作用，在低中pH這種化學鍵合固定相更適合酸性物質(zhì)的分離。

2.堿性條件下C18柱的選擇

化學鍵合相一直是研究的熱點。

每個硅烷化分子中含有兩個硅原子，兩個硅原子之間有兩個硅原子-O-或-CH2-CH2等基團連接，每個硅原子含有一個C18官能團。其環(huán)狀結(jié)構(gòu)無論在低位都是低的pH在價值條件下，還是高的pH穩(wěn)定性高，柱效滿意。

與傳統(tǒng)的單齒化學鍵合相比，這種化學鍵合固定相的突出優(yōu)點是低、中、高pH值時穩(wěn)定性好。C18雙齒化學鍵合固定相的商品柱有ZorbaxExtend-C18色譜柱，其耐受性pH值達11.5、特別適合高pH強堿性化合物在流動相條件下進行有效的色譜分離。