氨基柱的反相使用是怎樣的？

先用正己烷-乙腈(99:1).5ml/min用氯仿、異丙醇、甲醇、甲醇-水(50:50)沖柱子的流速10倍體積。

以0.5ml/min30倍柱體積的流速pH11.0的氫氧化鈉(LUNA)水溶液沖柱子(注意pH其值不得超過11.0)，立即用水(0).5ml/min沖洗流速，30倍柱體積)，然后用流動相代替。

制備流動相時，每個組分應(yīng)單獨測量，比例較小的組分應(yīng)精確測量，需要調(diào)整pH精確到0確到0.1。

在反相條件下使用時，應(yīng)特別注意控制pH值范圍，pH值越低，水解風險越大，流動相中水的比例越高，水解風險越大。pH范圍在pH3.0-7.0

如果要使用的流動相也含有緩沖鹽，建議使用相同比例的流動相過渡，而不含緩沖鹽，以避免緩沖鹽在分析柱中的沉淀。

在一種情況下，當使用氨基柱分析酸性物質(zhì)時，酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在，這可能導(dǎo)致略帶負電荷的氨基官能團質(zhì)子化，導(dǎo)致某些分析物質(zhì)的保留性質(zhì)在使用一段時間后發(fā)生變化或柱效應(yīng)降低。建議：使用5-10倍柱體積的0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗柱(當然，多余的氨應(yīng)該在沖洗后用不含堿的流動相清洗)，然后在分析這種酸性分析時，建議在流動相中加入少許氨，如0.1%。