氨基柱是一種可以同時用于正相和反相條件的色譜柱。但正相溶劑和反相溶劑不相互溶解,這一點不容忽視。對于新購買的柱子,請注意打開分析測試說明,了解柱子的保存溶劑。如果保存溶劑與您將要使用的流動極性不同,則不會相互溶解,請首先使用異丙醇進行過渡。在過渡過程中,注意異丙醇粘度高,會導(dǎo)致柱壓高,適當(dāng)降低流速。如果流動相中有緩沖鹽,首先使用不含緩沖鹽的同比流動相過渡,以避免緩沖鹽的沉淀。
說到氨基柱,我們熟悉的是拿它來做糖的分析。這是一個典型的例子。除了HILIC除模式外,氨基柱還可用作正相和弱陰離子交換兩種模式??梢哉f,應(yīng)用范圍和模式都很廣。
說了這么多,我們來看看氨基柱如何使用和維護。
如果使用新色譜柱HILIC模式,使用前請使用異丙醇小流速過夜平衡色譜柱。建議流速為0.1mL/min,然后轉(zhuǎn)換到100%乙腈沖洗20柱體積,再轉(zhuǎn)換到與流量相同比例的無鹽乙腈水系統(tǒng)沖洗20柱體積。
1.沖洗
用乙腈:水=色譜柱在60:40清洗時,不建議水相比例超過40%,過度使用水相容易導(dǎo)致鍵合相水解。
2.色譜柱再生
當(dāng)色譜柱長期使用,柱效很低時,可對色譜柱進行再生處理,使用乙腈:水(水中加入0.05%氨水)=60:40條件沖洗30柱體積。
3.保存
保存一個月內(nèi),請使用與所選流動相同的有機溶劑和水混合溶液(不含酸,無機鹽)更換,請避免只用水更換;長期保存一個月以上,經(jīng)上述處理后,請用乙腈更換保存。