制備色譜是指利用色譜技術制備純物質,即分離和收集一種或多種色譜純物質。為了加快分離時間,提高分離效率,制備色譜的樣品量很大,導致制備色譜柱的分離負荷相應增加,必須增加色譜柱填料,增加制備色譜的直徑和長度,使用相對較多的流動相。
中壓制備色譜中的“制備”這個概念是指獲得足夠的單一化合物來滿足研究和其他用途。色譜的出現(xiàn)建立了色譜技術和經濟效益。制備量和成本是制備色譜的兩個重要指標。其中,氣相制備色譜主要用于石化產品和揮發(fā)性天然產品的色譜純樣品制備。
制備類型是指所有待分離的樣品數(shù)量不僅以分析為目的,而且純化合物的數(shù)量取決于其用途:
1.微克至毫克級樣品一般用于波譜測試,如分離天然產品;
2.毫克級樣品可用于進一步的結構鑒定、化學反應一些生物活性測試;
3.克數(shù)量級樣品可用于進一步的生物活性測試,作為合成、半合成工作的原料和標準產品。
色譜是從混合物中分離成分的重要方法之一。壓制色譜的色譜技術甚至可以分離物理化學性能差異很小的化合物。當混合物各成分的化學或物理性質非常接近,其他分離技術難以或根本無法應用時,色譜技術越來越顯示出其實際有效的優(yōu)勢。例如,只有色譜技術才能達到消旋體處理等許多方面所需的產品純度標準。因此,在醫(yī)藥生物和精細化工行業(yè)中,發(fā)展色譜技術進行大規(guī)模純物質分離提取的重要性日益增加。
中壓制備色譜的構成
傳統(tǒng)的色譜制備一般由恒流泵、紫外線探測器和色譜柱組成,可連續(xù)輸送液體。zui重要的部件是不同的價格,不同款式的色譜柱,這也影響著色譜柱的影響zui最終制備效果的關鍵環(huán)節(jié)。柱子有很多種,不僅材料不同,而且填料也有很多知識。以下是柱子的一些簡要信息:
各種規(guī)格的玻璃柱在實驗室里很容易得到,而且價格也很低,但玻璃柱的致命弱點是它能承受的壓力很小,而且很容易破碎。當壓力過小導致相流速度緩慢時,采用高液位或高壓空氣(或氮氣)是一個簡單的解決方案。在底部添加真空也可以在一定程度上解決這個問題。
不銹鋼柱具有良好的耐腐蝕性和耐壓性,但價格相對昂貴。如果只有很小的分離任務和資金允許,市場直徑為1cm小型制備柱是。有機玻璃柱也能抵抗壓力和腐蝕。與不銹鋼柱相比,它是半透明的可以看到液體的運行狀態(tài),有色物質的特性更加突出。硅膠,鍵合固定相(如C18)、離子交換樹脂、聚酰胺、氧化鋁、凝膠等均可作為色譜柱填料。