液相色譜柱是由柱管、壓蓋、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭和螺絲等組件構(gòu)成的。柱管通常采用不銹鋼制造,壓力較低時也可以使用厚壁玻璃或石英管,內(nèi)壁要求非常光滑。為了提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁經(jīng)常進(jìn)行拋光處理。有些人還會在不銹鋼柱內(nèi)壁涂上氟塑料,以提高內(nèi)壁的光滑度,其效果與拋光相同,此外,還有使用熔融硅或玻璃襯里的色譜柱,專用于細(xì)直徑柱。
色譜柱兩端的接頭內(nèi)部安裝有篩板,通常由燒結(jié)不銹鋼或鈦合金制成,具體材質(zhì)取決于填料的粒度,目的是防止填料溢出。柱內(nèi)徑一般根據(jù)柱長度、填料粒徑和折合流速來確定,以避免管壁效應(yīng)。
液相色譜柱是否封端會對檢測結(jié)果產(chǎn)生哪些影響?
由于空間位阻效應(yīng),較大的硅烷分子無法與載體表面上較小的硅羥基完全反應(yīng),因此會存在殘留的羥基。而且,當(dāng)使用雙或三官能團(tuán)的硅烷化試劑時,還會形成新的硅羥基。
殘留的羥基,尤其是在反相填料中,對產(chǎn)品性能有顯著影響。它能減弱表面的疏水性,對極性化合物,尤其是堿性溶質(zhì)會發(fā)生二次化學(xué)吸附。而殘留羥基濃度的改變則是導(dǎo)致產(chǎn)品性能不穩(wěn)定的重要原因之一。
因此,在改進(jìn)鍵合反應(yīng)本身的同時,一般需要在鍵合反應(yīng)結(jié)束后使用三甲基氯硅烷或六甲基二硅胺等小分子硅烷進(jìn)行處理,也就是所謂的封端,以減少殘留的硅羥基含量,這對提高鍵合填料的穩(wěn)定性至關(guān)重要。
另外,還有一些色譜柱不進(jìn)行封尾處理,使其與水系統(tǒng)的流動相更具有良好的“濕潤”性能,在特定條件下可以更好地分離分析一些極性化合物。