手性色譜柱是一種利用高效液相色譜技術(shù)實(shí)現(xiàn)手性分離的方法,主要包括液相色譜、超高效液相色譜、毛細(xì)管電色譜等不同模式。它能夠有效地分離不對稱分子的鏡像異構(gòu)體,以其高效、準(zhǔn)確和可靠的特點(diǎn)成為分離光學(xué)異構(gòu)體的首選方法。手性色譜柱的分離原理是基于其固定的手性選擇性試劑提供各種手性選擇性,從而實(shí)現(xiàn)手性化合物的區(qū)別。使用手性色譜柱可能會遇到的問題包括:
1、柱壓增高,則正手性色譜柱效果會提升
高壓產(chǎn)生的原因可能是因?yàn)榱鲃酉嘀写己窟^高,或者液相通路被堵塞,或者柱頭有樣品析出,或者填料受到高壓壓縮導(dǎo)致柱頭下陷等。針對不同原因,應(yīng)該采取具有針對性的對策。如果是因?yàn)榱鲃酉嘀写己窟^高,則應(yīng)該升高溫度或減慢流速。若液相通路被堵塞,則需要清除堵塞物。若柱頭有樣品析出,則應(yīng)使用流動相溶解樣品并對樣品進(jìn)行預(yù)處理以去除易析出的成分。如果填料被高壓壓縮導(dǎo)致柱頭下陷,則需重新購買新設(shè)備。
2、手性分離色譜柱圖中不同異構(gòu)體的分離效果降低
色譜分離度降低的原因可能是由于色譜柱外部條件發(fā)生變化,或者柱子受到損害影響柱效。首先要查看是否由于溫度、溶液成分等外部因素的變化導(dǎo)致分離效果下降,若排除了各種外部因素,則可能是柱效降低導(dǎo)致的。如果分離度在短時(shí)間內(nèi)急劇下降并伴隨柱壓升高,可能是由于強(qiáng)極性溶劑損害了柱子;如果分離度在長時(shí)間內(nèi)緩慢下降,可能是柱頭受到污染或壓縮,需要更換防護(hù)柱或者更換色譜柱。
手性色譜柱是由具有光學(xué)活性的單體固定在硅膠或其他聚合物上制成的,形成手性固定相。引入手性環(huán)境可以使對映異構(gòu)體展現(xiàn)物理特征上的差異,從而實(shí)現(xiàn)光學(xué)異構(gòu)體的分離。