色譜儀中出現(xiàn)“鬼峰”可能是由于多種原因引起的,在這里列舉了一些主要的原因及相應(yīng)的排除方法:
1.進樣針受污染:如果進行連續(xù)進樣,在某個位置出現(xiàn)忽高忽低的峰,最可能是因為進樣針受到污染。這種情況下應(yīng)當(dāng)清洗進樣針,留意黑垢的干擾,一些樣品容易殘留在針管內(nèi),可重新取樣進行分析。
2.污染排放量的管控:采取與前述相同的處理方法。
3.樣品中有未知成分:改良樣品的預(yù)處理方法。
4.流動相污染:流動相中的污染物可能會逐漸聚集到色譜柱上,導(dǎo)致保留時間的偏移。這時應(yīng)當(dāng)更換新的流動相,盡量現(xiàn)場現(xiàn)配,隔夜后再次使用時應(yīng)過濾,并力求使用HPLC級別的試劑。
5.柱切換問題:如果在檢測的固定位置出現(xiàn)了小的峰值,很可能是由于柱切換引起的。
6.可能是由于檢測器設(shè)置不當(dāng)、進樣量過大或樣品濃度過高,導(dǎo)致出現(xiàn)平頂峰。
7.管路中存在小氣泡:打開排氣閥,提高流速以排除。
8.在流動相中添加少量的添加劑,比如離子對試劑等,需要相當(dāng)長的時間來使色譜柱達到平衡。通常,需要10到20個柱體積的流動相來進行平衡。
9. 色譜柱老化:色譜柱使用時間過長,或者經(jīng)常使用在惡劣的條件下,可能會導(dǎo)致色譜柱性能下降,進而出現(xiàn)“鬼峰”。此時,應(yīng)當(dāng)考慮更換新的色譜柱。
10. 儀器系統(tǒng)問題:如果色譜儀系統(tǒng)存在問題,比如泵的壓力不穩(wěn)定,或者溫度控制系統(tǒng)失效,也可能導(dǎo)致“鬼峰”的出現(xiàn)。此時,應(yīng)當(dāng)對儀器進行全面的檢查和維護。
11. 樣品前處理不當(dāng):樣品的前處理過程,如過濾、稀釋、離心等,如果操作不當(dāng),可能會引入雜質(zhì),進而在色譜儀中產(chǎn)生“鬼峰”。因此,樣品的前處理過程需要嚴(yán)格遵循操作規(guī)程。
12. 流動相配比問題:流動相的配比也會影響色譜儀的檢測結(jié)果。如果流動相的配比不正確,可能會導(dǎo)致某些成分在色譜柱上不能得到良好的分離,進而產(chǎn)生“鬼峰”。此時,應(yīng)當(dāng)重新調(diào)整流動相的配比。
在排除“鬼峰”的過程中,我們需要注意保持耐心和細心,對可能的原因進行逐一排查,確保找到正確的解決方法。同時,我們也需要定期對色譜儀進行維護和保養(yǎng),以保證其長期的穩(wěn)定運行。