在高效液相色譜分析中,基線是指色譜柱經(jīng)流動(dòng)相沖洗,與流動(dòng)相達(dá)到平衡后,檢測(cè)器在一段時(shí)間內(nèi)測(cè)出的信號(hào)曲線。在色譜儀各項(xiàng)檢測(cè)條件正常的情況下,基線應(yīng)平行于時(shí)間軸。然而,高效液相色譜基線不穩(wěn)定可能由多種因素導(dǎo)致,這些因素涉及液相色譜系統(tǒng)的多個(gè)組成部分。以下是一些常見的原因及其相應(yīng)的解決方法:
一色譜柱相關(guān)因素
01色譜柱未平衡:原因:色譜柱在更換流動(dòng)相或長時(shí)間未使用后,需要一定的時(shí)間來達(dá)到平衡狀態(tài)。在平衡過程中,基線可能會(huì)出現(xiàn)波動(dòng)。解決方法:使用中等強(qiáng)度的溶劑沖洗色譜柱,特別是在更換流動(dòng)相時(shí),應(yīng)先用10到20倍體積的新流動(dòng)相進(jìn)行沖洗,以確保色譜柱充分平衡。02色譜柱內(nèi)有氣泡:原因:色譜柱中的氣泡會(huì)影響流動(dòng)相的流動(dòng)性和色譜峰的形狀,從而導(dǎo)致基線不穩(wěn)定。解決方法:在檢測(cè)器的水池出口加負(fù)壓調(diào)節(jié)器,以減少氣泡的生成。同時(shí),檢查色譜柱的連接處是否緊密,防止空氣進(jìn)入。
原因:色譜柱在更換流動(dòng)相或長時(shí)間未使用后,需要一定的時(shí)間來達(dá)到平衡狀態(tài)。在平衡過程中,基線可能會(huì)出現(xiàn)波動(dòng)。
解決方法:使用中等強(qiáng)度的溶劑沖洗色譜柱,特別是在更換流動(dòng)相時(shí),應(yīng)先用10到20倍體積的新流動(dòng)相進(jìn)行沖洗,以確保色譜柱充分平衡。
原因:色譜柱中的氣泡會(huì)影響流動(dòng)相的流動(dòng)性和色譜峰的形狀,從而導(dǎo)致基線不穩(wěn)定。
解決方法:在檢測(cè)器的水池出口加負(fù)壓調(diào)節(jié)器,以減少氣泡的生成。同時(shí),檢查色譜柱的連接處是否緊密,防止空氣進(jìn)入。
二流動(dòng)相相關(guān)因素
01流動(dòng)相溶解氣體:原因:流動(dòng)相中的溶解氣體會(huì)在色譜柱內(nèi)析出,形成微小氣泡,影響基線穩(wěn)定性。解決方法:對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行超聲波脫氣處理,時(shí)間一般為15-30分鐘?;蛘咄ㄟ^充氮等方式去除溶解氣體。02流動(dòng)相配比不當(dāng)或流速變化:原因:流動(dòng)相的配比或流速的變化會(huì)直接影響色譜峰的分離效果和基線穩(wěn)定性。解決方法:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整流動(dòng)相的配比和流速,并定期檢查流動(dòng)相的組成及流速,確保其穩(wěn)定性。
原因:流動(dòng)相中的溶解氣體會(huì)在色譜柱內(nèi)析出,形成微小氣泡,影響基線穩(wěn)定性。
解決方法:對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行超聲波脫氣處理,時(shí)間一般為15-30分鐘?;蛘咄ㄟ^充氮等方式去除溶解氣體。
原因:流動(dòng)相的配比或流速的變化會(huì)直接影響色譜峰的分離效果和基線穩(wěn)定性。
解決方法:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整流動(dòng)相的配比和流速,并定期檢查流動(dòng)相的組成及流速,確保其穩(wěn)定性。
三泵相關(guān)因素
01高壓泵止回閥堵塞:原因:止回閥堵塞會(huì)導(dǎo)致流動(dòng)相流動(dòng)不暢,引起基線波動(dòng)。解決方法:拆除單向閥,用超聲波在純水中浸泡20分鐘以上,清除堵塞物。02高壓泵墊片損壞:原因:墊片損壞會(huì)導(dǎo)致泵壓不穩(wěn),進(jìn)而影響基線穩(wěn)定性。解決方法:更換高壓泵的密封墊,確保泵壓穩(wěn)定。03泵中有氣泡:原因:泵中的氣泡會(huì)隨流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱,影響基線穩(wěn)定性。解決方法:檢查泵的進(jìn)液口和排液口,確保無氣泡產(chǎn)生。如有必要,可拆開泵體進(jìn)行清洗和排氣。
原因:止回閥堵塞會(huì)導(dǎo)致流動(dòng)相流動(dòng)不暢,引起基線波動(dòng)。
解決方法:拆除單向閥,用超聲波在純水中浸泡20分鐘以上,清除堵塞物。
原因:墊片損壞會(huì)導(dǎo)致泵壓不穩(wěn),進(jìn)而影響基線穩(wěn)定性。
解決方法:更換高壓泵的密封墊,確保泵壓穩(wěn)定。
原因:泵中的氣泡會(huì)隨流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱,影響基線穩(wěn)定性。
解決方法:檢查泵的進(jìn)液口和排液口,確保無氣泡產(chǎn)生。如有必要,可拆開泵體進(jìn)行清洗和排氣。
四檢測(cè)器相關(guān)因素
01檢測(cè)器波長設(shè)置不當(dāng):原因:如果檢測(cè)器的波長沒有設(shè)置在樣品的最大吸收波長處,會(huì)導(dǎo)致基線不穩(wěn)定。解決方法:將探測(cè)器的測(cè)試波長調(diào)整到樣品的最大吸收波長處。02檢測(cè)器污染:原因:長期使用后,檢測(cè)器內(nèi)部可能會(huì)積累污染物,影響基線穩(wěn)定性。解決方法:定期清洗檢測(cè)器,去除污染物??梢允褂眉状蓟蚱渌麖?qiáng)極性溶劑進(jìn)行沖洗。
原因:如果檢測(cè)器的波長沒有設(shè)置在樣品的最大吸收波長處,會(huì)導(dǎo)致基線不穩(wěn)定。
解決方法:將探測(cè)器的測(cè)試波長調(diào)整到樣品的最大吸收波長處。
原因:長期使用后,檢測(cè)器內(nèi)部可能會(huì)積累污染物,影響基線穩(wěn)定性。
解決方法:定期清洗檢測(cè)器,去除污染物??梢允褂眉状蓟蚱渌麖?qiáng)極性溶劑進(jìn)行沖洗。
五其他因素
其他因素
01柱溫波動(dòng):原因:柱溫的微小變化都可能引起基線的波動(dòng)。解決方法:控制好柱子和流動(dòng)相的溫度,在檢測(cè)器之前使用熱交換器來穩(wěn)定溫度。02系統(tǒng)漏液:原因:系統(tǒng)中可能存在漏液點(diǎn),導(dǎo)致流動(dòng)相流失和基線不穩(wěn)定。解決方法:檢查管路接頭是否松動(dòng)、泵是否漏液等,確保系統(tǒng)密封性良好。
原因:柱溫的微小變化都可能引起基線的波動(dòng)。
解決方法:控制好柱子和流動(dòng)相的溫度,在檢測(cè)器之前使用熱交換器來穩(wěn)定溫度。
原因:系統(tǒng)中可能存在漏液點(diǎn),導(dǎo)致流動(dòng)相流失和基線不穩(wěn)定。
解決方法:檢查管路接頭是否松動(dòng)、泵是否漏液等,確保系統(tǒng)密封性良好。
綜上所述,高效液相色譜基線不穩(wěn)定可能由多種因素導(dǎo)致。在解決問題時(shí),需要綜合考慮色譜柱、流動(dòng)相、泵、檢測(cè)器以及系統(tǒng)其他部分的狀況,并采取相應(yīng)的措施進(jìn)行調(diào)整和優(yōu)化。
地址:廣州市黃埔區(qū)攬?jiān)侣?號(hào)國際企業(yè)孵化器F座310
電話:18922204815 18922204821 020-32051815
傳真:020-84418344
郵箱:mzzhang@chiral-se.com
關(guān)注我們
聯(lián)系銷售
友情鏈接:手性色譜填料 智慧食堂 點(diǎn)膠機(jī) 商業(yè)設(shè)計(jì) 變頻器廠家 自動(dòng)攻牙機(jī) SolidWorks 電子站牌 壓片糖果加工 廣州發(fā)電機(jī)廠家 人臉識(shí)別攝像機(jī) 邊緣計(jì)算盒子 專利代理機(jī)構(gòu)