在使用通用型反相色譜柱之前,應(yīng)對(duì)其性能進(jìn)行測(cè)試并保存結(jié)果,以便今后參考柱性能變化。但需要注意的是,液相色譜柱的性能可能因樣品、流動(dòng)相和柱溫等條件的差異而有所不同。此外,性能測(cè)試應(yīng)根據(jù)色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行,因?yàn)檫@是出廠測(cè)試所采用的標(biāo)準(zhǔn)條件,只有這樣,才能確保測(cè)試結(jié)果的可比性。
樣品的預(yù)處理:
a、采用活性相溶液樣品。
b、使用預(yù)處理柱去除樣品中強(qiáng)極性雜質(zhì)或與柱填料發(fā)生不可逆吸附的物質(zhì)。
c、使用0.45μm的過濾膜來去除微小的顆粒雜質(zhì)。
通用反相色譜柱的維護(hù)方法
在使用通用型反相色譜柱之前,應(yīng)對(duì)其性能進(jìn)行測(cè)試,并將結(jié)果保存,以便作為評(píng)估柱性能變化的參考。
請(qǐng)注意:柱子的性能可能會(huì)因?yàn)闃悠奉愋?、流?dòng)相、柱溫等條件的不同而有所變化。此外,在進(jìn)行柱性能測(cè)試時(shí),應(yīng)按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測(cè)試所用的條件是*條件),只有這樣才能確保結(jié)果具備可比性。在對(duì)色譜柱使用前進(jìn)行測(cè)試后,應(yīng)根據(jù)具體情況對(duì)色譜柱進(jìn)行適當(dāng)?shù)木S護(hù)。
通用型反相色譜柱在每天實(shí)驗(yàn)后需進(jìn)行保養(yǎng):在使用緩沖液或含鹽的流動(dòng)相后,實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)需用10%的甲醇/水溶液沖洗30分鐘,以去除色譜柱中的鹽分,然后再用甲醇沖洗30分鐘。
請(qǐng)注意:不可用純水沖洗柱子,應(yīng)在水中添加10%的甲醇,以防止填料塌陷。
色譜柱的長(zhǎng)期保存:若需長(zhǎng)期保存色譜柱,必須置于適當(dāng)?shù)娜軇┲小?duì)于反相色譜柱,可以使用純甲醇或乙腈進(jìn)行儲(chǔ)存;針對(duì)正相色譜柱,應(yīng)選擇嚴(yán)格脫水的純正己烷;而離子交換色譜柱則可保存在含有防腐劑(如柳硫汞)的水中,且需使用隨新色譜柱附帶的堵頭封閉。儲(chǔ)存溫度應(yīng)保持在室溫。
除了上述的日常保養(yǎng)與長(zhǎng)期保存措施外,定期檢查和評(píng)估色譜柱的狀態(tài)也是不可或缺的環(huán)節(jié)。每完成一定數(shù)量的樣品分析后,應(yīng)評(píng)估色譜柱的分辨率、柱效及基線穩(wěn)定性等關(guān)鍵性能指標(biāo),以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)并解決潛在問題。若發(fā)現(xiàn)色譜峰拖尾、柱壓升高或分離度明顯下降,可能是柱內(nèi)污染或填料降解的跡象,此時(shí)應(yīng)考慮進(jìn)行更深入的清洗或再生處理。
對(duì)于深度清洗,可選用適合色譜柱填料的強(qiáng)溶劑體系,如含有低濃度有機(jī)酸的溶液,通過增加清洗液的溶解能力和減少吸附效應(yīng)來去除頑固的污染物。但需注意,過強(qiáng)的溶劑可能會(huì)損害柱填料,因此選擇和使用時(shí)需謹(jǐn)慎。
此外,還應(yīng)重視色譜柱使用的環(huán)境條件,如溫度波動(dòng)、濕度以及直接暴露于光照和空氣中的情況,這些都可能對(duì)色譜柱的穩(wěn)定性和性能產(chǎn)生影響。建議在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)安裝溫濕度控制系統(tǒng),并保持環(huán)境整潔,以減少外部因素對(duì)色譜柱的負(fù)面影響。
最后,記錄每次維護(hù)的細(xì)節(jié)和結(jié)果,包括清洗方法、溶劑種類、時(shí)間、以及處理前后的性能對(duì)比等,這對(duì)于優(yōu)化色譜柱使用策略、延長(zhǎng)其使用壽命以及未來的問題排查都具有重要意義。通過這些細(xì)致的維護(hù)工作,我們可以確保通用型反相色譜柱始終保持最佳狀態(tài),為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性提供堅(jiān)實(shí)保障。