通用反相液相色譜柱的結(jié)構(gòu):
空柱由柱連接件、柱管和濾片組成。
柱接頭采用低死體積設(shè)計,由兩端螺紋組件組成。一端為7/16英寸外螺紋,另一端為3/16英寸內(nèi)螺紋。7/16英寸外螺紋與1/4英寸(Φ6.35mm)柱管連接,并在中間置入壓環(huán)以實現(xiàn)密封。3/16英寸內(nèi)螺紋則與1/16英寸(Φ1.57mm)連接管相連,中間同樣放置壓環(huán)進(jìn)行密封。為減少柱外死體積,安裝色譜柱時,應(yīng)將Φ1.57mm連接管通過空心螺釘壓環(huán)盡量插到底部,然后再擰緊空心螺釘。壓環(huán)在空心螺釘?shù)臄D壓下變形,從而緊緊固定在連接管上(連接管通過壓環(huán)后露出的部分長度需嚴(yán)格控制在2.5mm或其他指定尺寸內(nèi))。
在兩端的柱接頭內(nèi),柱管的兩端各放置一片不銹鋼濾片(或濾網(wǎng)),用于防止柱填料因流動相的沖擊而泄漏。整個空柱的組件均采用316#不銹鋼材質(zhì),能夠耐受一般溶劑的作用。然而,由于含氯化物的溶劑對不銹鋼有一定的腐蝕性,因此在使用時需特別注意,避免在柱及連接管內(nèi)長時間存放這種溶劑,以防止腐蝕的發(fā)生。
通用反相液相色譜柱的安裝方法:
1、打開柱子包裝盒,檢查色譜柱的型號、規(guī)格、生產(chǎn)日期及內(nèi)部存儲的溶劑。
2、將柱兩端接頭的密封堵頭卸下,并放回包裝盒以備后用。
3、根據(jù)柱管上指示的流動相方向,將色譜柱的入口通過連接管與進(jìn)樣閥的出口相連(如果條件允許,建議在柱前使用保護(hù)柱);柱的出口應(yīng)連接至檢測器。所用連接管為外徑1.57mm、內(nèi)徑0.1-0.3mm的不銹鋼管。連接管的兩端配有空心螺釘和密封用的壓環(huán)。在連接時一定要盡量減少柱外的死體積。連接管在通過空心螺釘和壓環(huán)時要插到底,然后順時針方向擰緊空心螺釘,直到無法再擰動為止。接著,用扳手進(jìn)一步順時針擰動1/4至1/2圈,注意不要用力過大。如果色譜柱在流動相加壓后出現(xiàn)漏液現(xiàn)象,請繼續(xù)用扳手順時針擰動1/4圈,直至不再漏液為止。
4、連接完成后,對整個液相色譜系統(tǒng)進(jìn)行壓力測試。首先,緩慢地開啟泵,以較低的流速(如0.2ml/min)讓流動相通過色譜柱,觀察是否有異常聲音或明顯的壓力波動。若一切正常,可逐步增加流速至工作流速,再次檢查系統(tǒng)穩(wěn)定性及柱子的密封性。
5、在進(jìn)行正式分析前,需對色譜柱進(jìn)行平衡。根據(jù)待測樣品所需的流動相組成,配制好流動相并過濾脫氣后,以適當(dāng)?shù)牧魉贈_洗色譜柱,直至基線穩(wěn)定,無明顯波動。此過程有助于去除柱子中可能殘留的雜質(zhì),確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。
6、安裝并調(diào)試完成后,啟動數(shù)據(jù)采集軟件,設(shè)置合適的檢測參數(shù),如波長、采樣頻率等,準(zhǔn)備進(jìn)行樣品分析。同時,記錄下色譜柱的安裝日期、使用條件及每次使用后的維護(hù)情況,以便追蹤色譜柱的性能變化,及時采取必要的維護(hù)措施,延長其使用壽命。
7、最后,切記在完成分析任務(wù)后,及時清洗色譜柱,避免殘留物對柱子造成損害。根據(jù)使用的流動相類型,選擇合適的清洗溶劑,按照制造商推薦的清洗程序進(jìn)行操作,確保色譜柱處于最佳狀態(tài),為下一次分析做好準(zhǔn)備。