刷型固定相手性識(shí)別原理主要是三點(diǎn)作用原理，要實(shí)現(xiàn)對(duì)映體與固定相之間至少存在三點(diǎn)相互作用。這些作用可以是氫鍵、靜電作用、偶極-偶極作用、疏水作用或空間作用等，并且其中一點(diǎn)要有立體選擇性。

固定相手性分子中的3個(gè)位點(diǎn)A、B、C與被拆分的化合物某一對(duì)映體分子中相應(yīng)的位點(diǎn)A’、B'、C’發(fā)生作用，而與化合物的另一對(duì)映體分子至多只能發(fā)生兩點(diǎn)相互作用，由此，兩對(duì)映體因與固定相的作用一對(duì)映體力不同而被分離。

圖 3 三點(diǎn)作用模式

如圖3所示，當(dāng)手性固定相與對(duì)映體(I)相互作用的部位為 A…A'、B…B’和C…C'，而與對(duì)映體(II)缺少C…C’作用部位時(shí)，如果C…C'是相互吸引部位,則對(duì)映體(I)比)在柱上的保留時(shí)間長；如果C…C’是相互排斥部位，則對(duì)映體(I)可先被洗脫；如果C…C’之間相互作用極弱或完全沒有作用，則不能被分離。

刷型手性固定相一般采用正相色譜體系，以含一定量異丙醇(0.2%~20%)的正已烷為流動(dòng)相，有時(shí)也采用四氫呋喃和其他氫鍵受體溶劑。這類固定相也可以在反相體系中應(yīng)用，但大多數(shù)情況下正相體系中的分離效果相對(duì)好一些。

刷型手性固定相的優(yōu)點(diǎn)是柱效和柱容量高，不僅用于對(duì)映體分析，也可用于對(duì)映體制備分離。除了用于常規(guī)HPLC，還可用于超臨界流體色譜(SFC)和模擬移動(dòng)床色譜(SMB)中。基于立體識(shí)別機(jī)制，該類固定相可預(yù)測對(duì)映體洗脫順序或改變對(duì)映體洗脫順序，這對(duì)對(duì)映體雜質(zhì)的檢查分析具有重要的意義。由于該類固定相一般共價(jià)鍵合在硅膠表面，所以推薦的流動(dòng)相pH值范圍在2.5~7.5之間。

圖 4 不同流動(dòng)相改性試劑對(duì)萘普生對(duì)映體手性拆分的影響

在選擇流動(dòng)相條件時(shí)，首先以不加改性劑的流動(dòng)相進(jìn)行摸索，如果被分離物是酸性或堿性較強(qiáng)的物質(zhì)，為了改善峰形或提高分離度，可在流動(dòng)相中加入一些改性劑，如圖 4所示但改性劑的加入量一般不超過0.1%。通常拆分酸性化合物時(shí)加入的改性劑為醋酸或醋酸銨，拆分堿性化合物時(shí)加入的改性劑是三乙胺、二乙胺或醋酸銨。而需要注意的是，常用的三氟乙酸改性劑在刷型手性固定相中是限制使用的。另外，柱溫對(duì)此類手性固定相的拆分性能有較大的影響。

刷型手性固定相在手性化合物的分離中得到了廣泛的應(yīng)用，它既可以用作反相色譜，也可以用于正相色譜，存在有不足之處，如對(duì)于不含芳香環(huán)的化合物，在分離之前要先進(jìn)行芳香化反應(yīng)才能進(jìn)行拆分，這大大限制了這類固定相的應(yīng)用范圍。

參考文獻(xiàn)：

1.刷型手性固定相及其在手性化合物分離中的應(yīng)用，周英珍等；