1.使用干凈的自來水和乙腈對系統(tǒng)進(jìn)行沖洗,確保系統(tǒng)內(nèi)部沒有任何緩沖鹽和污染物,保持清潔。
2.在使用色譜柱時,請注意避免碰撞和跌落。
3.將反相液相色譜柱的入口端連接到系統(tǒng)上,柱的出口端暫時不要連接。色譜柱身上有箭頭指示正確的流動方向。
4.在0.1 mL/min的流速下使用反相液相色譜柱,接著在2分鐘內(nèi)將流速提高至0.5 mL/min。
5.當(dāng)溶劑均勻地從柱子的出口流出時,停止流動,并將反相液相色譜柱的出口連接到系統(tǒng)檢測器上,這樣可以防止氣泡進(jìn)入檢測系統(tǒng),并且能夠迅速達(dá)到基線平衡。
6.重啟流速時,按照步驟4的方法逐步增加流速,直到達(dá)到常規(guī)分析所需的流速。
7.根據(jù)柱效測試報告中的方法,需使用5-10倍柱體積的流動相對反相液相色譜柱進(jìn)行平衡,直到系統(tǒng)壓力和基線達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。
8.進(jìn)行柱效測試。如果測試報告中缺少分析物,請聯(lián)系沃特世的化學(xué)耗材部門尋求幫助,并使用適當(dāng)?shù)臐舛群瓦M(jìn)樣量。柱效結(jié)果略低于報告中的數(shù)據(jù)屬于正常情況。如果結(jié)果明顯偏低且出現(xiàn)峰形拖尾,則意味著色譜柱和/或所用液相系統(tǒng)可能存在問題,需要進(jìn)行故障排查。
9. 故障排查時,首先檢查色譜柱是否正確安裝,確保所有連接處緊密無泄漏。接著,回顧溶劑和樣品的準(zhǔn)備過程,確認(rèn)是否使用了正確的溶劑體系和純凈度,以及樣品是否經(jīng)過適當(dāng)?shù)念A(yù)處理。
10. 若問題依舊存在,考慮色譜柱的保存條件和使用期限。長時間未使用的色譜柱或保存不當(dāng)可能導(dǎo)致性能下降,需按照制造商的指南進(jìn)行活化或更換新柱。
11. 在日常使用中,定期記錄色譜柱的使用情況和維護日志,包括清洗、平衡、測試及任何異?,F(xiàn)象的記錄,這將有助于及時發(fā)現(xiàn)潛在問題并優(yōu)化實驗流程。
12. 最后,每次實驗結(jié)束后,按照標(biāo)準(zhǔn)程序?qū)ο到y(tǒng)進(jìn)行徹底清洗,以保護色譜柱免受殘留物損害,延長其使用壽命。確保所有步驟都遵循實驗室安全規(guī)范,保障人員安全及實驗環(huán)境的整潔。
通過以上細(xì)致的操作與維護,反相液相色譜柱的性能得以最大化發(fā)揮,為科研分析提供準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)支持。