蛋白質分離純化的五大步驟。蛋白質分離純化是用生物工程下游技術從混合物之當中分離純化出所需要得目的蛋白質的方法。是當代生物產業(yè)當中的核心技術。該技術難度、成本均高；例如一個生物藥品的成本75%都花在下游蛋白質分離純化當中。

　　1、鹽析法

　　鹽析法的根據是蛋白質在稀鹽溶液中，溶解度會隨鹽濃度的增高而上升，但當鹽濃度增高到一定數值的時候，使水活度降低，進而導致蛋白質分子表面電荷逐漸被中和，水化膜逐漸被破壞，最終引起蛋白質分子間互相凝聚并從溶液中析出。

　　2、有機溶劑沉淀法

　　有機溶劑能降低蛋白質溶解度的原因有二：其一、與鹽溶液一樣具有脫水作用；其二、有機溶劑的介電常數比水小，導致溶劑的極性減小。

　　3、蛋白質沉淀劑

　　蛋白質沉淀劑僅對一類或一種蛋白質沉淀起作用，常見的有堿性蛋白質、凝集素和重金屬等。

　　4、聚乙二醇沉淀作用

　　聚乙二醇和右旋糖酐硫酸鈉等水溶性非離子型聚合物可使蛋白質發(fā)生沉淀作用。

　　5、選擇性沉淀法

　　根據各種蛋白質在不同物理化學因子作用下穩(wěn)定性不同的特點，用適當的選擇性沉淀法，即可使雜蛋白變性沉淀，而欲分離的有效成分則存在于溶液中，從而達到純化有效成分的目的。

　　不同蛋白質具有不同的等電點，它們在被離子交換劑結合以前，移動之距離是不同的，洗脫出來的先后次序是按等電點排列的。