分離純化是將多糖混合物分離為單一多糖的過(guò)程。蛋白的分離純化常見(jiàn)方法有離子交換、分子篩、疏水層析、親和層析等。在進(jìn)行菌種鑒定時(shí),所用的微生物一般均要求為純的培養(yǎng)物。得到純培養(yǎng)的過(guò)程稱為分離純化。
1、加熱法
混合物中混有熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)時(shí),可直接加熱,使熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)分解而分離出去。例如:食鹽中混有氯化銨,純堿中混有小蘇打等均可直接加熱除去雜質(zhì)。
2、沉淀法
在混合物中加入某試劑,使其中一種以沉淀形式分離出去的方法。使用該方法一定要注意不能引入新的雜質(zhì)。若使用多種試劑將溶液中不同微粒逐步沉淀時(shí),應(yīng)注意后加試劑能將前面所加試劑的過(guò)量部分除去,最后加的試劑不引入新的雜質(zhì)。例如,加適量BaCl2溶液可除去NaCl中混有的Na2SO4。
3、轉(zhuǎn)化法
不能通過(guò)一次反應(yīng)達(dá)到分離的目的時(shí),要經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)化為其他物質(zhì)才能分離,然后要將轉(zhuǎn)化物質(zhì)恢復(fù)為原物質(zhì)。例如:分離Fe3+和Al3+時(shí),可加入過(guò)量的NaOH溶液,生成Fe(OH)3和NaAlO2,過(guò)濾后,分別再加鹽酸重新生成Fe3+和Al3+。注意轉(zhuǎn)化過(guò)程中盡量減少被分離物質(zhì)的損失,而且轉(zhuǎn)化物質(zhì)要易恢復(fù)為原物質(zhì)。
4、酸堿法
被提純物質(zhì)不與酸堿反應(yīng),而雜質(zhì)可與酸堿發(fā)生反應(yīng),用酸堿作除雜試劑。例如:用鹽酸除去SiO2中的石灰石,用氫氧化鈉溶液除去鐵粉中的鋁粉等。
5、氧化還原法
對(duì)混合物中混有的還原性雜質(zhì),可加入適當(dāng)?shù)难趸瘎┦蛊浔谎趸癁楸惶峒兾镔|(zhì)。例如:將氯水滴入混有FeCl2的FeCl3溶液中,除去FeCl2雜質(zhì)。