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色譜柱反沖真的有用嗎？

欄目：行業(yè)資訊 發(fā)布時間：2024-06-24
那么，今天我們就來分析討論一下！色譜柱到底能不能反沖，以及背后的原因是什么?

液相色譜柱能夠反沖？

這是很多用液相色譜技術人員的一個疑問。


看到有小伙伴說，如果色譜柱柱頭堵了，壓力升高了，反沖完的效果也不錯。


也有小伙伴說，廠家說不建議反沖，沖了會影響柱效?。?！


那么，今天我們就來分析討論一下！色譜柱到底能不能反沖，以及背后的原因是什么?



Q

當色譜圖峰型變差或儀器壓力過高時，我們會使用不同溶劑對色譜柱進行反向沖洗，雖然看到了一些改進，但效果并不穩(wěn)定。我們該如何改進呢？

答：作為色譜柱生產廠家，小研并不提倡反向沖柱。大多數情況下，反向沖柱并不起作用，而當我們認為它起作用時，也可以通過更合理的方式來改善。

什么情況下我們需要嘗試對色譜柱反向沖洗？原因可能有：由于流動相或 HPLC 儀器中的樣品成分或碎屑堆積在柱頭導致的壓力升高、色譜柱性能顯著下降。

如果碎屑足夠多，就會聚集在色譜柱過濾片的外表面，導致過濾片損壞，這種情況下，更換過濾片與反向沖洗的效果是一樣的。

色譜柱構造示意圖

不過，根據小研的經驗，過濾片損壞的問題是比較少發(fā)生的，一般是色譜柱柱頭被污染物污染并吸附堵塞，導致色譜柱壓力升高。當污染物分子量較大或溶解度較低時，會堵塞色譜柱內填料之間的通道，而第一層填料受到污染物的作用力最大，填料層被擠壓重新排列、變形，甚至塌陷，最終導致峰形惡化。要修復這種填料結構內部的損壞是非常困難的，甚至是不可能的，反向沖洗色譜柱充其量只是一場賭博。

Q

反向沖洗可能不是一個很好的解決方案，但確實有幫助，至少可以讓色譜柱的壽命更長一些？


答：反沖色譜柱有一點幫助但不多，小研喜歡更可靠、更持久的解決方案——保護柱。

保護柱通常是指安裝在進樣器和分析柱之間的小短柱，通過預先捕集能被分析柱牢固吸附，不能被流動相所洗脫的物質，保護并延長分析柱使用壽命。

保護柱就像是疫情期間必備的口罩，把病毒阻擋在人體外面，流動相和樣品里如有什么損害柱子的污染物，保護柱就自己承受，不會讓其進入分析柱。



Q

市場上有許多不同的保護柱。我應該使用哪一種？


答：保護柱很重要，但選擇合適的保護柱更重要，選擇或使用不當也可能帶來截然相反的效果。保護柱的填料，要與分析柱保持一致！填料品牌一致，才能100%確保選擇性一致。


此外，保護柱的規(guī)格，要與分析柱匹配！填料粒徑一致，保護柱的內徑與分析柱的內徑相近。對于精細分離，保護柱本身的裝填柱效要足夠好！

保護柱建議專柱專用，避免保護柱成為不同項目的交叉污染源。當峰的理論塔板數下降15%，或是柱壓上升15%，或是關鍵分離度下降15%時，都應該及時更換保護柱。
好消息！

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總結
手性色譜柱嬌貴，需要嚴格按照說明書使用，反沖是不建議的！
知其然、知其所以然、知其所以必然。今日小研分享的知識就先到這啦，希望能對你們有所幫助！