液相分析工作中,我們經(jīng)常被峰拖尾的問題所困擾,當(dāng)遇到峰拖尾時要如何去排查呢?今天我們來總結(jié)一下。
峰拖尾的定義
01原因產(chǎn)生
1.操作條件:
流速過高、柱溫過高、pH過高或過低,以及過高的載液濃度等操作條件都可能導(dǎo)致峰拖尾。
2.柱篩板堵塞:
色譜柱的篩板堵塞,樣品進(jìn)入色譜柱時會受阻,液體流動受阻形成延遲,使得樣品在相中停留時間變長,從而使峰型拖尾。
3.色譜柱塌陷:
是指色譜柱由于其它原因引起了柱效率喪失,不能對物質(zhì)形成保留,使得物質(zhì)不在固定相上保留而隨流動相流出,但是又還有一點(diǎn)柱效,因此形成拖尾。
4.柱效應(yīng):
當(dāng)樣品中存在吸附性物質(zhì)時,這些物質(zhì)會在柱表面吸附難以解吸,從而導(dǎo)致峰拖尾。
此外,還有其他可能的原因,如干擾峰、樣品與填料表面發(fā)生反應(yīng)、樣品溶劑選擇不恰當(dāng)、樣品組分的不均一性等。
02解決方案
1.優(yōu)化操作條件:
調(diào)整流速、載液濃度、適當(dāng)提高柱溫,縮短樣品在色譜柱中的停留時間、對于堿性化合物,降低pH值有利于得到對稱峰等操作條件,以改善峰形。也可以選用堿性試劑與固定相發(fā)生反應(yīng),從而阻斷堿性化合物與固定性發(fā)生反應(yīng)。
2.維護(hù)色譜柱:
通過更換篩板或重新填充色譜柱等方式,解決篩板阻塞。
3.清洗色譜柱:
色譜柱出現(xiàn)了相塌陷后,通常用純乙腈或甲醇持續(xù)沖洗可以使出現(xiàn)相塌陷的色譜柱恢復(fù)到原來的狀態(tài),但完全恢復(fù)需要比較長的時間,通常30分鐘到1個小時是必須的。有一種更好的解決辦法是用丙酮做流動相進(jìn)行沖洗,所需時間更短、效果更好。
4.選擇合適的流動相和樣品溶劑:
使用更長的色譜柱、改變流動相或更換色譜柱,以提高分離效果。加入離子對試劑或堿性揮發(fā)性修飾劑,以改善樣品與填料的相容性。