首先先來了解一下手性柱,手性柱有正相手性柱和反向手性柱。但是大多是正相的,是不能進(jìn)水。反向的是可以進(jìn)水的。正相手性柱的鍵合相一般是蛋白質(zhì)、淀粉或纖維素,水能損壞鍵合相,那手性柱需要注意事項(xiàng)你都知道嗎?接下來一起來看看手性柱的分類和注意事項(xiàng)吧。
一、手性柱的分類
第1類:通過氫鍵、π-π作用、偶級(jí)-偶級(jí)作用形成復(fù)合物。
第2類:既有類型1中的相互作用,又存在包埋復(fù)合物。此類手性色譜柱中典型的是由纖維素及其衍生物制成的手性色譜柱。
第3類:基于溶劑進(jìn)入手性空穴形成包埋復(fù)合物。這類手性色譜柱中最典型的是由Armstrong教授開發(fā)的環(huán)糊精型手性柱[2],另外冠醚型手性柱和螺旋型聚合物,如聚(苯基甲基甲基丙烯酸酯)形成的手性色譜柱也屬于此類。
第4類:基于形成非對(duì)映體的金屬絡(luò)合物,是由Davankov開發(fā)的手性分離技術(shù),也稱為手性配位交換色譜(CLEC)。
第5類:蛋白質(zhì)型手性色譜柱。手性分離是基于疏水相互作用和極性相互作用實(shí)現(xiàn)。
二、手性柱的注意事項(xiàng)
(1)將色譜柱接到色譜儀之前,必須先用合適的溶劑沖洗流路(包括流通閥和定量環(huán))。
如之前是反相系統(tǒng),先用水把系統(tǒng)中可能含有的鹽沖洗干凈,再用異丙醇以2m/min沖洗1小時(shí)左右,再接色譜柱。(四根管路同時(shí)沖洗)。
(2)有些溶劑(比如丙酮、氯仿、DMF、二甲基亞砜、乙酸乙酯、二氯甲烷、THF)會(huì)破壞手性固定相,應(yīng)禁用。
(3)如果使用的是自動(dòng)進(jìn)樣器,進(jìn)樣間隔的沖洗液也必須更換成合適的溶劑。
三、手性柱的分析
對(duì)于150 x 4.6 mmID,250 x 4.6 mmID分析柱:
(1)流動(dòng)相方向:參照色譜柱標(biāo)簽上的箭頭。
(2)典型流速:0.5~1.0 m/min,不能超過1.5 m/min。最大流速也和流動(dòng)相粘度(流動(dòng)相成分)有關(guān),
必須小心不能超過柱壓上限。
(3)柱壓范圍:(約700 psi),最高不能超過100 Bar(約1400 psi)。
(4)溫度范圍:0~40°C。
綜上所述就是手性柱的分類和注意事項(xiàng),想要知道更多有關(guān)于手性柱的資訊,歡迎致電研創(chuàng)生物進(jìn)行資訊了解。