手性柱的類型都有哪些?手性色譜柱(Chiral HPLC Columns)是由具有光學活性的單體,固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相(Chiral Stationary Phases)。
第1類:通過氫鍵、π-π作用、偶極-偶極作用形成復合物。
第2類:既有類型1中的相互作用,又存在包埋復合物。此類手性色譜柱中典型的是由纖維素及其衍生物制成的手性色譜柱。
第3類:基于溶劑進入手性空穴形成包埋復合物。這類手性色譜柱中最典型的是由Armstrong教授開發(fā)的環(huán)糊精型手性柱[2],另外冠醚型手性柱和螺旋型聚合物,如聚(苯基甲基甲基丙烯酸酯)形成的手性色譜柱也屬于此類。
第4類:基于形成非對映體的金屬絡合物,是由Davankov開發(fā)的手性分離技術,也稱為手性配位交換色譜(CLEC)。
第5類:蛋白質型手性色譜柱。手性分離是基于疏水相互作用和極性相互作用實現。
A、配位交換型:
手性配位交換色譜(ChiralLigandExchangeChromatography,CLEC)由Davankov發(fā)明,是通過形成光學活性的金屬絡合物而達到手性分離,屬于IrvingWainer分類中的第4類手性固定相,主要用于分離氨基酸類。
由于此類固定相是由手性氨基酸—銅離子絡合物鍵合到硅膠或聚合物上形成,因此流動相中必須含有銅離子以保證手性固定相上的銅離子不至流失。其它的過渡金屬元素也已用于手性配位交換色譜,但銅離子應用最廣。形成絡合物的過程十分緩慢,因此有時需提高柱溫,最佳溫度約50℃。
手性配位交換色譜僅對α-氨基酸和其類似物有效。β-氨基酸很難用手性配位交換色譜得以分離。手性配位交換色譜可用于制備,由于流動相中存在銅離子,雖然銅離子能用離子交換柱除去,但增加了樣品處理的困難。
B、大環(huán)抗生素型:
大環(huán)抗生素型手性色譜柱是最近發(fā)展起來的,通過將大環(huán)抗生素鍵合到硅膠上制成的新型手性色譜柱。大環(huán)抗生素型手性色譜柱的出現歸功于DanArmstrong的貢獻。此類色譜柱常用的大環(huán)抗生素主要由三種:利福霉素(Rifamycin),萬古霉素(Vancomycin),替考拉寧(Ticoplanin)。利福霉素作為手性添加劑在毛細管電泳分離手性化合物方面得到了成功運用。萬古霉素和替考拉寧分子結構中存在“杯”狀結構區(qū)和糖“平面”結構區(qū)。此類色譜柱性質穩(wěn)定,可用于多種分離模式。手性分離基于氫鍵、π-π作用、形成包合物、離子作用和肽鍵等。