液相色譜柱的儲(chǔ)存液如果沒(méi)有特殊說(shuō)明，通常與評(píng)價(jià)報(bào)告中列出的流動(dòng)相相同。在使用之前，務(wù)必確認(rèn)儲(chǔ)存液與待分析樣品的流動(dòng)相是否可以互溶。在反相色譜分析中，若采用高濃度鹽或緩沖液作為洗脫劑，建議先用約10%的低濃度有機(jī)相洗脫劑進(jìn)行過(guò)渡，否則緩沖液中的鹽分在高濃度有機(jī)溶劑中容易析出，可能導(dǎo)致色譜柱堵塞。

液相色譜柱的柱壓升高可能由以下幾種原因引起。

1、流動(dòng)相的預(yù)處理

雜質(zhì)堵塞了色譜柱的入口濾片，導(dǎo)致壓力上升。這通常是因?yàn)榱鲃?dòng)相沒(méi)有經(jīng)過(guò)過(guò)濾，或者即使經(jīng)過(guò)了過(guò)濾，但過(guò)濾效果不佳，導(dǎo)致固體雜質(zhì)滯留在濾板上。

2、樣品的沉淀

當(dāng)溶解樣品的溶劑與流動(dòng)相不匹配時(shí)，樣品進(jìn)入色譜柱時(shí)可能會(huì)因?yàn)槿芙舛认陆刀霈F(xiàn)沉淀，從而導(dǎo)致壓力增加。

3、晶體的析出

在使用含有緩沖液的流動(dòng)相時(shí)，緩沖液中的無(wú)機(jī)鹽可能會(huì)在系統(tǒng)中留存。由于這些無(wú)機(jī)鹽在新的流動(dòng)相中的溶解度降低，它們可能會(huì)析出，從而導(dǎo)致流體阻力增大和壓力升高。

4、細(xì)菌或霉菌滋生

霉菌會(huì)在流動(dòng)相、管路或柱子入口處滋生，導(dǎo)致濾板堵塞，從而使壓力升高。因此，在使用磷酸鹽緩沖液時(shí)，通常需現(xiàn)調(diào)現(xiàn)用。

5、溶質(zhì)吸附

當(dāng)溶質(zhì)在柱子上的吸附力較強(qiáng)，而所使用的流動(dòng)相又難以將其洗脫時(shí)，未能洗脫的溶質(zhì)積累會(huì)導(dǎo)致阻力增大和壓力升高。

6、流動(dòng)相更換的頻率過(guò)于頻繁。

在更換流動(dòng)相體系時(shí)，不同性質(zhì)且互不相溶的流動(dòng)相同時(shí)存在于同一體系中，也會(huì)導(dǎo)致壓力增高。

7、壓力脈沖

在運(yùn)行過(guò)程中，有時(shí)系統(tǒng)內(nèi)的壓力會(huì)出現(xiàn)突然而劇烈的波動(dòng)。這種壓力脈沖可能導(dǎo)致多孔填料的破裂以及柱床結(jié)構(gòu)的細(xì)微變化。此外，填料微顆粒的長(zhǎng)期積累也有可能增加柱床的阻力，從而引起壓力的上升。