【方法】從成都熱電廠采集土樣中分離得到一株微生物菌種,分析該菌株的形態(tài)學(xué)特征、培養(yǎng)特征及16S rDNA序列,確定菌株的分類地位。利用Design-Expert軟件中的Box-Behnken法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),通過響應(yīng)面分析對初始pH值、溫度、接種量和裝液量4個(gè)因素進(jìn)行優(yōu)化,確定其最適培養(yǎng)條件。

　　【結(jié)果】獲得菌株Z1,該菌為革蘭氏陰性菌,短桿狀,經(jīng)16S rDNA鑒定為嗜酸性氧化亞鐵硫桿菌(Acidithiobacillus ferrooxidans,簡稱At.f)。確定菌株zui適培養(yǎng)條件為:pH 1.8、溫度30°C、接種量14%、裝液量250 mL搖瓶裝60 mL培養(yǎng)液。在此條件下,Z1的亞鐵氧化率可達(dá)99.7%。

　　【結(jié)論】Z1菌株適合于生物浸礦的應(yīng)用。

　　1947年,Colmer和Hinkle從礦山酸性廢水中分離出一株嗜酸桿菌命名為氧化亞鐵硫桿菌(Thiobacillus ferrooxidans,簡稱T.f),并證明該菌能促進(jìn)煤中黃天礦的氧化和溶解,這被認(rèn)為是微生物冶金研究的開端。

　　T.f屬于革蘭氏陰性菌,具有專性好氧、嗜酸、化能自養(yǎng)等特點(diǎn),該菌通過氧化亞鐵離子為三價(jià)鐵離子或氧化還原態(tài)硫化物為硫酸根而獲得生長和生命活動的能量,在生物脫硫、生物冶金、生物處理污泥中的重金屬和有色金屬回收等領(lǐng)域都具有一定的應(yīng)用價(jià)值。隨著生物技術(shù)的快速發(fā)展,微生物的鑒定手段被大大豐富,尤其是分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,使微生物的分類和鑒定結(jié)果更為快捷、準(zhǔn)確。

　　Peng H.從不同的礦井水中分離出4株不同的氧化亞鐵硫桿菌,應(yīng)用16S rDNA序列分析法進(jìn)行了分類和鑒定。科研人員用單因素或正交實(shí)驗(yàn)對氧化亞鐵硫桿菌的培養(yǎng)條件進(jìn)行了研究。

　　響應(yīng)面分析法是分析響應(yīng)變量η與一組輸入變量(ζ1,ζ2,ζ3...ζk)之間的函數(shù)關(guān)系[η=f(ζ1,ζ2,ζ3...ζk)],也是一種實(shí)驗(yàn)條件尋優(yōu)的方法,微生物菌種適合于解決非線性數(shù)據(jù)處理的相關(guān)問題。與以往的單因素或正交實(shí)驗(yàn)相比,其優(yōu)點(diǎn)在于不僅能確定單因素對菌株活性的影響,而且能分析各個(gè)因素間交互作用的大小,同時(shí)通過回歸模型可以分析出影響菌株活性的主要因素。