在液相色譜分析過程中，我們經(jīng)常遇到的問題主要有二種，一種與液相色譜儀器本身因素有關(guān)，如液相色譜的閥門、混合器、檢測(cè)器的光源以及其它的一些硬件設(shè)備。出現(xiàn)這類問題后，如果能找出問題根源，解決起來(lái)一般很簡(jiǎn)單，而且這類問題可以通過對(duì)儀器的精心維護(hù)來(lái)避免；而另一類問題則是分析方法本身造成的問題，如出現(xiàn)色譜峰形狀不好、峰與峰之間不能分開、基線飄移等等。不幸的是，如果出現(xiàn)這類問題，看起來(lái)似乎很明顯，但是要找出原因并解決這類問題卻非常困難。

　　為了減少出現(xiàn)這一類型的問題，就必須在分析之前，仔細(xì)研究并選擇一個(gè)好的分析方法，有了一個(gè)好的分析方法，就很容易獲得理想的分離效果，而且在出現(xiàn)問題是也很便于找出原因。要選擇一個(gè)好的分析方法，就必須對(duì)液相色譜分析的一些基本原則要有一個(gè)很深的了解。下面是我們實(shí)驗(yàn)室對(duì)色譜分析人員進(jìn)行技能培訓(xùn)的一些基本知識(shí)。

　　一：分析方法選擇的基本原則

　　假如你想做一頓豐盛的晚餐，首先必須看一下食譜，然后檢查一下你所需的東西是否齊全，如果少了配料還必須去商店購(gòu)買，這樣你才可能做出一頓可口的晚餐。同樣進(jìn)行液相色譜分析時(shí)，也必須按照一定的程序進(jìn)行，首先你必須要有專門的儀器和試劑，然后有目的地選擇分析方法，這樣你才可能得到好的分析結(jié)果，避免走一些彎路。

　　二：柱子的選擇

　　在液相色譜分析方法中最重要的就是色譜柱的選擇，色譜分析人員面對(duì)幾百種色譜柱，你從何入手呢？采取的方法就是訂閱LCGC亞太版中Ron Majors的“色譜柱觀察”這一專欄，自１９８４年第一期以來(lái)，Ron Majors在這一專欄中介紹許多新柱子、色譜柱新技術(shù)、色譜柱使用方法等方面的信息。

　　現(xiàn)在大部分液相色譜分析都是使用反相色譜柱，其中以C18和C８柱最為流行。

　　然而色譜分析并不是流行歌曲，這兩種色譜柱之所以運(yùn)用廣泛是因?yàn)樵诖蠖鄶?shù)情況下，使用這兩種柱子都能獲得理想的分離效果。盡管一些樣品的分離并不是這兩種柱子，但C18和C８經(jīng)常是最好的固定相，C18和C８柱兩者之間并無(wú)明顯的差別，但在我們實(shí)驗(yàn)室中經(jīng)常使用的是C８柱。

　　在過去的１５年中，高純度、低金屬雜質(zhì)含量的硅膠基質(zhì)色譜柱是最為實(shí)用的色譜柱之一。但傳統(tǒng)色譜分析用的硅膠顆粒具有差異性及酸性表面，固定在柱子表面后，導(dǎo)致出現(xiàn)拖尾峰，而且柱與柱之間的重現(xiàn)性較差。最近硅膠基質(zhì)中出現(xiàn)一種新的產(chǎn)品，這種硅膠具有Ｍetal-free特性，因此柱子性能更穩(wěn)定，重現(xiàn)性也更好，分離后峰的形狀也很不錯(cuò)。

　　這種改性后的硅膠稱為Ｂ型硅膠。由于具有上述優(yōu)點(diǎn)，大多數(shù)色譜制造商都用不同的名稱來(lái)表明它們與傳統(tǒng)的產(chǎn)品之間的不同，如Intertsil（日本）、BDS（USA）、YMC--Base(USA)等等。大多數(shù)色譜柱制造商都生產(chǎn)以Ｂ型硅膠為基質(zhì)的色譜柱，因此你可以選擇你所喜歡的供應(yīng)商提供的產(chǎn)品。由于這種產(chǎn)品具有上述特性，建議使用Ａ型硅膠柱的改為使用Ｂ硅膠柱。