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手性柱為什么會(huì)出現(xiàn)拖尾?

欄目:行業(yè)資訊 發(fā)布時(shí)間:2021-09-14
手性柱為什么會(huì)出現(xiàn)拖尾?每個(gè)實(shí)驗(yàn)員的實(shí)驗(yàn)生涯,總會(huì)遇到那么n次色譜峰拖尾。那么色譜峰為什么會(huì)拖尾呢?是柱子壞了?還是操作失誤?下面就一起來(lái)看看那吧!

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手性柱

  1、柱物理?yè)p壞

  色譜柱有物理?yè)p壞是造成峰形拖尾的根源。唯一的解決方法就是更換新柱。

  2、柱內(nèi)填料污染

  流動(dòng)相和樣品中的雜質(zhì)是色譜柱主要污染源。

  流動(dòng)相所用的各種溶劑至少是分析純,盡量使用色譜純?cè)噭?。流?dòng)相所用的水要是超純水或全玻璃器皿雙蒸水。用前先用0.45um溶劑微孔過(guò)濾(器)過(guò)濾,除去可能存在的微粒。流動(dòng)相建議現(xiàn)用現(xiàn)配,對(duì)于含鹽的溶液尤其注意長(zhǎng)置會(huì)產(chǎn)生細(xì)菌或出現(xiàn)沉淀。此外還得保證儲(chǔ)存流動(dòng)相的容器清潔。

  3、柱進(jìn)口處有異物

  當(dāng)斷定是柱進(jìn)口處有異物時(shí),可將柱頭螺絲卸下,取出濾帽并將其置于20%硝酸溶液中,用超聲波清洗約20分鐘,再置于超純水中,并用超聲波清洗約10分鐘,重新裝入色譜柱內(nèi)即可。

  4、樣品濃度過(guò)高致使柱超載

  樣品在柱上超載能引起峰展寬,拖尾(或伸舌)。

  適當(dāng)減小進(jìn)樣量或樣品濃度(需要時(shí),可提高檢測(cè)器靈敏度)直至峰形和保留時(shí)間不再改變,便可消除這種不良影響。減小進(jìn)樣量還能改善其分離度。正常情況下,樣品中每種化合物在150×4.6mm柱中進(jìn)樣量保持在3~50ug范圍內(nèi),不會(huì)引起明顯超載。

  5、柱外效應(yīng)

  柱外效應(yīng)(即進(jìn)樣閥、色譜柱及檢測(cè)器間的管路過(guò)長(zhǎng)、直徑過(guò)粗、管路接頭不匹配、有死體積)是影響色譜柱柱效的主要因素之一。所以在可能的條件下,色譜柱的兩端連接管路要盡可能短,連接管內(nèi)徑盡可能細(xì)小,切口務(wù)必平整光滑,盡可能的減小死體積,以防止因樣品擴(kuò)散造成不能反映色譜柱真實(shí)柱效等情況發(fā)生。

  6、緩沖不足或不合適

  在緩沖不好或離子強(qiáng)度過(guò)低的分離中,也會(huì)出現(xiàn)保留時(shí)間重現(xiàn)性差和峰形拖尾。增加緩沖濃度(與樣品大小相匹配)能改善此情況。

  希望大家看到這里,以后遇到峰拖尾時(shí)能有一定的排查方向,若不能解決的,便及時(shí)與經(jīng)銷(xiāo)商或廠家溝通,配合排查。